هدف از استفاده از ddNTP چیست؟

2024 نویسنده: Stanley Ellington | [email protected]. آخرین اصلاح شده: 2023-12-16 00:16

DdNTP اشاره دارد به دیدئوکسی نوکلئوتیدها تری فسفات ها که در روش دی اکسی سنگر برای تولید طول های مختلف رشته های DNA برای توالی یابی DNA استفاده می شوند. این منجر به خاتمه فرآیند پلیمریزاسیون DNA (یا طویل شدن DNA) می شود زیرا این فرآیند برای ادامه به یک گروه 3'-OH نیاز دارد.

بنابراین، چرا ddNTP ها در توالی یابی استفاده می شوند؟

دیدئوکسی نوکلئوتیدها مهارکننده های طویل کننده DNA پلیمراز هستند، استفاده شده در روش سنگر برای DNA ترتیب دهی به دی اکسی ریبونوکلئوتیدها گروه هیدروکسیل 3' ندارند، از این رو وقتی این دی اکسی نوکلئوتید روی زنجیره قرار می گیرد، دیگر ازدیاد طول زنجیره رخ نمی دهد. این می تواند منجر به خاتمه DNA شود توالی.

به طور مشابه، آیا ddNTP ها به dNTP ها متصل می شوند؟ یک یا چند مورد از dNTP ها به صورت رادیواکتیو برای کمک به تجسم محصولات تکثیر برچسب گذاری شده اند. در نهایت، هر لوله یکی از چهار نوکلئوتید خاص به نام را دریافت می کند دی اکسی نوکلئوتیدها ( ddNTP ها ) با این حال، پس از ادغام، DNA پلیمراز نمی تواند زنجیره را بیشتر گسترش دهد زیرا به 3'-OH نیاز دارد. ضمیمه کردن به نوکلئوتید بعدی

به طور مشابه ممکن است بپرسید، چگونه ddNTP ها یک واکنش توالی را متوقف می کنند؟

هنگامی که به مقدار کم در واکنش های توالی تری فسفات های دی اکسی ریبونوکلئوزید ( ddNTP ها ) خاتمه دادن به واکنش توالی در موقعیت های مختلف در رشته های DNA در حال رشد. ddNTP ها یک واکنش توالی یابی را متوقف می کنند زیرا آنها: باعث سقوط DNA پلیمراز از رشته الگو می شوند. ج

چه تکنیکی شامل Dideoxynucleotides می تواند مورد استفاده قرار گیرد؟

توالی سانگر یک است روش توالی‌یابی DNA بر اساس ترکیب انتخابی پایان‌دهنده زنجیره دی اکسی نوکلئوتیدها توسط DNA پلیمراز در طول همانندسازی DNA در شرایط آزمایشگاهی. این برنامه توسط فردریک سانگر و همکارانش در سال 1977 توسعه یافت و گسترده ترین بود استفاده شده ترتیب دهی روش برای تقریبا 40 سال