آیا می توانید محصول PCR را توالی یابی کنید؟

2024 نویسنده: Stanley Ellington | [email protected]. آخرین اصلاح شده: 2023-12-16 00:16

مستقیم ترتیب دهی از محصولات PCR . به طور مستقیم امکان پذیر است توالی آ محصول PCR بدون کلون کردن قطعه. مستقیم تعیین توالی PCR به ندرت موفق است مگر اینکه شما مدتی را برای اطمینان از آن صرف کنید شما نمی افتند یکی از تله های فراوان

به این ترتیب تعیین توالی PCR چیست؟

مستقیم ترتیب دهی از PCR محصولات. شما باید همه را حذف کنید PCR آغازگرها و نوکلئوتیدهای ترکیب نشده قبل از محصول است توالی شده . ترتیب دهی فقط از یک پرایمر به جای دو پرایمر استفاده می شود PCR . اگر هر دو پرایمر را حذف نکنید، دو پرایمر دریافت خواهید کرد دنباله ها روی یکدیگر قرار گرفته اند که قابل خواندن نیستند.

به همین ترتیب، آیا می توانم از پرایمرهای PCR برای تعیین توالی استفاده کنم؟ پرایمرهای PCR در نظر گرفته شده اند PCR تقویت برای به دست آوردن یک آمپلیکون آغازگرهای توالی یابی هستند استفاده شده به توالی یک قطعه DNA و نشان دادن DNA آن توالی شناسایی 4. دو پرایمرهای PCR در الف مورد نیاز هستند PCR واکنش (معمولا)؛ فقط یکی پرایمر توالی یابی به الف اضافه می شود ترتیب دهی واکنش.

با در نظر گرفتن این موضوع، چگونه محصولات PCR را آزمایش می کنید؟

تشخیص و تجزیه و تحلیل محصولات PCR . این تولید - محصول از یک PCR باید قطعه یا قطعاتی از DNA با طول مشخص باشد. بسیاری از تکنیک ها را می توان برای تشخیص توالی های تقویت شده استفاده کرد (جدول را ببینید). ساده ترین و رایج ترین روش الکتروفورز است محصول PCR روی ژل آگارز با EtBr (اتیدیوم بروماید).

چرا لازم است محصولات PCR قبل از تعیین توالی خالص شوند؟

تطهیر DNA از a PCR واکنش به طور معمول است لازم برای استفاده در پایین دست، و حذف آنزیم ها، نوکلئوتیدها، آغازگرها و اجزای بافر را تسهیل می کند.