اگر آنزیم محدود کننده بیش از حد اضافه کنید چه اتفاقی می افتد؟
اگر آنزیم محدود کننده بیش از حد اضافه کنید چه اتفاقی می افتد؟

تصویری: اگر آنزیم محدود کننده بیش از حد اضافه کنید چه اتفاقی می افتد؟

تصویری: اگر آنزیم محدود کننده بیش از حد اضافه کنید چه اتفاقی می افتد؟
تصویری: What can you expect at a sex party? Consenting Adults Ep 36 "Sex Party Enthusiast" 2024, آوریل
Anonim

هضم ناقص ممکن است رخ دهد وقتی خیلی زیاد یا هم مقدار کمی آنزیم استفاده می شود. این وجود آلاینده ها در را نمونه DNA می توان مهار کند آنزیم ها ، همچنین منجر به هضم ناقص می شود. مقداری آنزیم های محدود کننده برای فعالیت کامل به کوفاکتور نیاز دارند.

علاوه بر این، چرا آنزیم های محدود کننده در آخر اضافه می شوند؟

این آنزیم محدود کننده معمولا است آخر جزء اضافه به یک واکنش برای اطمینان از اینکه در معرض شرایط شدید قرار نمی گیرد. پس از آن واکنش مونتاژ شده باید مخلوط شود آنزیم علاوه بر این. تمام محلول های حاوی را مخلوط کنید آنزیم های محدود کننده به آرامی برای جلوگیری از آنزیم غیر فعال سازی

علاوه بر این، چگونه می توان هضم آنزیم محدود کننده را بهبود بخشید؟ بیش از حد توصیه شده استفاده نکنید آنزیم مقدار (به عنوان مثال، 10 واحد از آنزیم در هر میکروگرم DNA). مقدار را کاهش دهید آنزیم در واکنش، در صورت لزوم. اجتناب از انکوباسیون طولانی مدت هضم واکنش. از بافر واکنش توصیه شده استفاده کنید.

همچنین بدانید، چرا یک آنزیم محدود کننده قطع نمی شود؟

آماده سازی DNA برای شکافتن باید عاری از آلاینده هایی مانند فنل، کلروفرم، الکل، EDTA، مواد شوینده یا نمک های بیش از حد باشد که همگی می توانند با آنزیم محدود کننده فعالیت. اگر یک مهارکننده (اغلب نمک، EDTA یا فنل) وجود داشته باشد، DNA کنترل کننده وجود خواهد داشت بریده نشده پس از مخلوط کردن

چرا مقدار آنزیم می تواند باعث فعالیت ستاره شود؟

فعالیت ستاره است آرامش یا تغییر ویژگی محدودیت آنزیم برش میانجی DNA که می توان در شرایط واکنشی رخ می دهد که به طور قابل توجهی با شرایط بهینه برای واکنش متفاوت است آنزیم . فعالیت ستاره می تواند به دلیل وجود Mg رخ می دهد2+، مانند است برای مثال در HindIII دیده می شود.

توصیه شده: